注意事项:
1)取材动作要迅速。
2)不要损伤所需要的部分。
2.固定。中**尔马林固定液中固定,固定30-50min。
注意事项:1)阴凉处,不宜放在日光下。
2)使用前才混合。
3)固定液必须充足。
4)容器外上标签。
3. 洗涤。
材料经固定后,流水冲洗。
4. 脱水。
材料依次经%各级乙醇溶液脱水,各30min,再放入%各2次,每次20min。
5.透明。纯酒精、二甲苯等量混合液15min,二甲苯ⅰ15min、ⅱ15min(至透明为止)。
透明注意事项。
1)使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。
2)更换每级透明剂,动作要迅速,一方面为了不使材料块干涸,另一方面能避免吸收湿气。
3)在透明过程中, 如果材料周围出现白色雾状,说明材料中的水未被脱净,应退回纯酒精中重新脱水,然后再透明。
6.透蜡。透蜡的目的是除去组织中的透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便包埋。
7. 包埋。
包埋时,用镊子夹取石蜡模子(金属质地)在酒精灯上稍加热,放在平的桌面上,从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯,倒入少许石蜡。再将镊子在酒精灯上稍加热,夹取材料将切面朝下放入蜡模中,排列整齐。再放上包埋盒,轻轻倒入熔蜡。
8. 切片。
9. 展片、贴片。
10. 脱蜡复水。
11. 染色。
12.水洗。
13.分化。
14.漂洗。
15.脱水ⅰ
切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3-5min。
16、复染。
用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。
伊红主要染细胞质,着色浓淡应与苏木精染细胞核的浓淡相配合,如果细胞核染色较浓,细胞质也应浓染,以获得鲜明的对比。反之,如果细胞核染色较浅,细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染,促使细胞质容易着色,并且经乙醇脱水时不易褪色。
17.脱水ⅱ
将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min。最后用吸水纸吸干多余的乙醇。
18.透明。
切片放入二甲苯ⅰ、ⅱ中各3-5min。
二甲苯应尽量保持无水,应经常更换,或用纱布包无水硫酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲苯**现白雾现象,说明脱水未尽,应退回乙醇中重新脱水,否则切片难以镜检。
19.封藏:中性树胶封存。
因切片经二甲苯透明,使用中性树胶作为封藏剂,树胶可用二甲苯稀释至合适的稠度。
石蜡切片的详细制作过程
石蜡切片的制作过程主要包括 取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。1 取材。材料的好坏直接影响到切片的质量,无论取哪一种动植物材料,以下几点是必须注意的。1 植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分 动物材料取用时常对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和乙醚,...
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1 手工刻绘法 用刻字机或手绘将 写在白纸上 用美工刀挖去需要印刷的部分 准备印料,如果是深色布用胶浆 浅色布用水浆即可 准备框绷上80 120目丝 准备印料 把刻好的字放在布料上 压上空白的丝 倒入印料 刮板填满并收干印料 撕掉印完的纸张,依次类推。2 感光制版法 如果数量较大,内容一样,可以用此...