复习班生物二轮复习专题三实验与**。
一） 观察类实验（6个）,
1．实验原理。
1)甲基绿和吡罗红对dna和rna的亲和力不同
显示dna和rna在细胞中的分布。
2)盐酸：改变细胞膜的通透性―→加速染色剂进入细胞；使染色质中的dna与蛋白质分离―→有利于dna与染色剂结合。
2．实验流程。
4个注意问题。
1)选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱鳞片叶内表皮细胞，不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，以防止颜色的干扰。
2)用缓水流的目的：防止载玻片上的细胞被冲走。
3)几种试剂在实验中的作用。
0.9%的nacl溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。
8%的盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；b.使染色质中dna与蛋白质分离，有利于dna与染色剂结合。
蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片。
吡罗红甲基绿染液：混合使用，且现用现配。
4)dna和rna在细胞核和细胞质中均有分布，只是量的不同，故结论中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。
即时巩固】(2014·长沙市模拟)下图表示观察dna和rna在细胞中的分布实验基本实验步骤，对该实验基本步骤的叙述错误的是( )
a．①表示制片，首先应在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的nacl溶液。
b．②表示解离，需要用质量分数8%的盐酸处理烘干后的装片。
c．③表示用缓水流冲洗，以免影响染色。
d．④表示用甲基绿和吡罗红对标本先后进行染色。
1.实验原理。
1)观察叶绿体应选用富含叶绿体的藓类叶片或菠菜叶等。由于叶绿体本身含有色素，呈绿色，所以不需要染色。
2)观察线粒体应选用动物或人体细胞，如人口腔上皮细胞。用健那绿染液染色，健那绿染液是专一性用于线粒体染色的活细胞染料，能将线粒体染成蓝绿色。
2.实验步骤。
1)叶绿体的观察：
低倍镜观察：在低倍镜下找到叶肉细胞。
高倍镜观察：在高倍镜下，观察叶绿体的形态和分布情况。
2)线粒体观察：
制片。低倍镜观察：找到口腔上皮细胞。
高倍镜观察：线粒体呈蓝绿色，细胞质接近无色。
3.注意点5个。
1)观察叶绿体应选用细胞内叶绿体数量较少、体积较大、叶片薄的植物（如苔藓类，黑藻，菠菜下表皮带叶肉细胞）
2)观察线粒体应选择无色细胞如口腔上皮细胞。不能选择含叶绿体的植物细胞，因为叶绿体的绿色会影响被染成蓝绿色的线粒体的观察。
3)该实验要保持细胞的生活状态，临时装片随时保持有水状态。观察线粒体需染色。
4)健那绿染液是专一性对线粒体染色的活体染料，可使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
5)线粒体和叶绿体的双层膜是电子显微镜下能看到而光学显微镜下看不到的结构。
即时巩固】(2014·宿州模拟)下列有关用高倍镜观察线粒体和叶绿体的实验说法不正确的是( )
a．健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。
b．观察叶绿体时选用藓类的叶或黑藻的叶，原因是叶片薄而小，叶绿体清楚。
c．用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。
d．可用高倍镜直接观察叶绿体和线粒体。
1．实验原理。
成熟的植物细胞构成渗透系统可发生渗透作用。
2．质壁分离与复原实验流程。
3.植物细胞质壁分离及复原有关的5个总结。
1)实验材料的选择（紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞、黑藻叶肉细胞）
一般不选择细菌细胞，它能发生质壁分离，但现象不明显。
不能选择动物细胞，它无细胞壁，不能发生质壁分离现象。
2)实验试剂使用。
使用浓度过高的蔗糖溶液(0.5 g/ml)，质壁分离现象明显，但不能复原，因为溶液浓度过高，细胞过度失水而死亡。
使用质量浓度为1 mol·l－1的kno3溶液，因为k＋和no可被细胞吸收，使细胞液浓度增大，所以细胞先发生质壁分离后又自动复原(尿素、甘油、乙二醇等现象同上)。
3)发生质壁分离时在细胞壁和细胞膜之间充满的是外界溶液，原因是细胞壁具有全透性。
4)质壁分离与复原过程中水分移动是双向的，总结果是单向的。
5)本实验用显微镜观察了三次，第一次与第二次形成对照，第三次与第二次形成对照，该对照方法为自身对照。
4．质壁分离实验的拓展应用。
1)判断成熟植物细胞是否有生物活性。
2)测定细胞液浓度范围。
3)比较不同植物细胞的细胞液浓度(4)比较未知浓度溶液的浓度大小。
5)鉴别不同种类的溶液(如kno3和蔗糖溶液)
即时巩固】(2014·江苏四市调研)某同学**“不同浓度蔗糖溶液对叶表皮细胞形态的影响”，得到下图所示结果。相关叙述不正确的是。
a．实验主要原理是成熟的植物细胞能够发生渗透作用。
b．实验中需要使用血细胞计数板、盖玻片、显微镜等仪器。
c．叶表皮细胞浸润在蒸馏水中时，细胞会发生膨胀。
d．结果表明大多数细胞的细胞液浓度介于0.2～0.25 mmol/l之间， ]
1．实验原理。
1)植物的分生组织细胞有丝**较为旺盛。
2)有丝**各个时期细胞内染色体行为变化不同，根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝**的哪个时期。
3)细胞核内的染色体(质)易被碱性染料着色。
2．实验操作步骤及分析。
3.易错点5个。
1)解离时间要严格控制，解离时间不能太短，否则细胞间果胶未溶解，压片时细胞不易分散；时间过长则细胞分离过度、过于酥软，无法取出根尖进行染色和制片。
2)漂洗是为洗去细胞内部的盐酸，因此要保证足够的时间，否则会影响对染色体(质)的染色。
3)控制染色时间，染色时间不能太短，否则染色体或染色质不能完全着色；时间过长则使细胞核等其他部分充满染色剂无法分辨染色体。
4)对细胞有丝**的过程观察不可能看到连续的**过程，因为在解离过程中细胞已经死亡，我们观察到的只是一个固定的时期，要不断地移动装片，在不同的视野中找到各个时期的**图像，所以在制作装片时要让细胞分散成一层，这样才能找到各个**时期的细胞。
5)在显微镜下观察到间期的细胞数目最多，因为间期历时最长。
即时巩固】在“观察植物细胞的有丝**”实验中，以下操作和结论正确的是( )
a．剪取5 cm根尖，用15%盐酸和甲基绿分别解离和染色。
b．持续观察细胞①，能看到**成两个子细胞。
c．细胞①中dna数是细胞②中的二倍。
d．观察装片时，③时期的细胞数目最多。
1、实验步骤。
1)装片制作(同有丝**装片制作过程)：
解离→漂洗→染色→压片。
2)显微观察：
2.观察减数**实验的2个注意点。
1)实验材料的选取。
宜选用雄性个体***官，其原因为：①雄性个体产生精子数量多于雌性个体产生卵细胞数量。②在动物卵巢内的减数**没有进行彻底，排卵时排出的仅仅是次级卵母细胞，只有和精子相遇后，在精子的刺激下，才继续完成减ⅱ**。
2)精巢内精原细胞既进行有丝**，又进行减数**，因此可以观察到染色体数为n、2n、4n等不同的细胞**图像。
即时巩固】小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小鼠细胞减数**的实验步骤。
供选材料及试剂：小鼠的肾脏，**、肝脏，苏丹ⅲ染液，醋酸洋红染液，詹纳斯绿b(健那绿)染液、解离固定液。
1)取材：用___作实验材料。
2)制片：①取少量组织低渗处理后，放在___溶液中，一定时间后轻轻漂洗。
将漂洗后的组织放在载玻片上，滴加适量___
一定时间后加盖玻片。
3)观察：用显微镜观察时，发现几种不同特征的**中期细胞。若它们正常**，产生的子细胞是。
下图是观察到的同源染色体(a1和a2)的配对情况。若a1正常，a2发生的改变可能是___
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