1mol/l nacl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
ctab抽提液。
2%(w/v)ctab(古立烷基三乙基溴化铵)
100mmol/l 8.0 *
1.4mol/l nacl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
ctab/nacl 溶液(10% ctab/0.7mol/l nacl)
在80ml h2o中溶解4.1g nacl,缓慢加入10一ctab(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。如果需要,可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml.
ctab沉淀液。
1%(w/v) ctab
50mmol/l ph 8.0
10mmol/l edta, ph8.0
pbs缓冲液:
定容至5000ml, 调ph至7.2。
elisa包被液:
定容至1000ml,调ph至9.6。
elisa洗涤液(0.01m pbst):
5000ml pbs中加2.5ml吐温-20
显色液(底物溶液-邻苯二胺溶液):
ph5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液:0.
1 m 柠檬酸(19.2 g/l) 24.3 ml、0.
2 m na2hpo4 (28.4 g/l) 25.7 ml、 临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺(opd)4 mg,溶解后加入30%h2o2 15 l;
终止液:2 m h2so4
te缓冲液(ph8.0):
高压灭菌。10% sds:
10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中,加热至68℃溶解,加几滴浓盐酸调ph至7.2,定容至100ml,过滤除菌。
50×tae缓冲液。
tris 242 g
冰醋酸 57.1 ml
0.5 mol/l edta(ph8.0) 100 ml
用水定容至1000 ml,用时稀释50倍。
5×tbe缓冲液:
加水定容至1000ml,0.5×使用。
6×dna上样缓冲液:
0.25%溴酚蓝*
0.25%二甲苯青ff*
30%甘油。
甲醛凝胶加样缓冲液(depc处理水配制):
50%甘油。
1mmol/l edta(ph8.0)
0.25溴酚蓝*
0.25二甲苯青ff*
适量溴化乙锭*
20×ssc:
溶解后用5n氢氧化钠调ph至7.0,定容至1000ml,高压灭菌保存。
预杂交液:6×ssc
5×denhardt试剂。
0.5% sds
100ug/ml经变性并断裂成片段的鲑精dna
5×甲醛凝胶电泳缓冲液:
0.1mol/l mops(ph7.0)*
40mmol/l乙酸钠。
5mmol/l edta(ph8.0)*
甲醛变性凝胶配方:
加入0.7 g琼脂糖到49.7 ml depc-h2o中,用煮沸法溶解琼脂糖,待溶液冷却至55℃同时加入7 ml 10×mops(0.
2 mol/l mops ph7.0, 20 m mol/l 乙酸钠,10 m mol/l edta ph8.0)电泳缓冲液和13.
3 ml甲醛,摇匀,制板待用。
0.5 mol/l磷酸缓冲液(ph 7.2)
134 g na2hpo4, 4 ml 85% h3po4,用水定容至1l。
探针标记中的逆转录终止液1×ten
40 m mol/l tris-cl (ph 7.5),1 m mol/l edta (ph 8.0),150 m mol/l nacl。
洗膜液ⅰ 2×ssc, 0.1%(m/v)sds
洗膜液ⅱ 0.1×ssc, 0.1%(m/v)sds
sds-page 电泳分析所用的试剂:
30%丙烯酰胺: 29g丙烯酰胺和1g n ,n ’亚甲基双丙烯酰胺,加入60ml ddh2o,完全溶解后定容至100ml,过滤,置棕色瓶中备用。
tris-甘氨酸电泳缓冲液: tris 3.00g,甘氨酸14.4g,sds 1g,调ph至8.3,用水定容至1l。
12%分离胶: ddh2o 3.3ml,30%丙烯酰胺4ml,tris-hcl(ph8.
8)2.5ml,10%sds 0.1ml,10%过硫酸铵0.
1ml,temed 0.006ml。
5%浓缩胶: ddh2o 1.4ml,30%丙烯酰胺0.
33ml,tris-hcl(ph6.6)0.25ml,10%sds0.
02ml,10%过硫酸铵0.02ml,temed 0.002ml。
考马斯亮蓝染色液: 乙醇450ml,冰醋酸100ml,ddh2o 450ml,考马斯亮蓝r-250 2.5g。
脱色液(1l): 乙醇450ml,冰醋酸100ml,ddh2o 450ml。
2×上样缓冲液: 100mmol/l tris-hcl(ph6.8),200mmol/l 二硫苏糖醇(dtt),4% sds,0.2%溴酚蓝,20%甘油。
蛋白纯化所需的缓冲液:
buffer b(ph 8.0):8m urea、100 mm nah2pomm tris-cl
buffer c(ph 6.3):8m urea、100 mm nah2pomm tris-cl
buffer d(ph 5.9):8m urea、100 mm nah2pomm tris-cl
buffer e(ph 4.5):8m urea、100 mm nah2pomm tris-cl
电洗脱缓冲液:
定容至1000ml
蛋白提取缓冲液:
电转移缓冲液:
tris-base 3.00g,甘氨酸14.4g,sds 1g,甲醇 200ml,调ph至8.3,用水定容至1l。
western blot所用试剂:
1×pbs(ph7.4):nacl 8 g,kcl 0.2 g,kh2po4 0.24 g,na2hpo4 1.44g,用蒸馏水溶解至1 l
1×pbst:5l 1×pbs 中加入2.5ml tween-20
封闭液:100ml pbs缓冲液中加入5克脱脂奶粉。
植物基本培养基溶液。
微量元素(1l)
有机(1l)
mss培养基。
msr(1l)
水稻转化用培养基。
水稻转化用激素和化合物的配制。
1) 2,4-d(1mg/ml):称取100mg 2,4-d置于小烧杯内,加少量无水乙醇使之完全溶解后,将水缓慢加入不停搅拌的2,4-d酒精溶液中,不可出现沉淀,定容至100ml,过滤除菌。
2) 6-ba (1mg/ml):称取100mg 6-ba置于小烧杯内,加少量1m koh溶解,慢慢加灭菌蒸馏水至100ml,过滤除菌,4℃保存。
3)naa(1mg/ml):称取100mg naa置于小烧杯内,用1m koh溶解,慢慢加灭菌蒸馏水至100ml,过滤除菌,4℃保存。